常用培養(yǎng)基的制備及注意事項(xiàng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馀囵B(yǎng)基的配制原理；掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟；了解常見(jiàn)滅菌、清毒基本原理及方法；掌握干熱天菌、高壓蒸汽滅菌及過(guò)濾除菌的操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工按一定比例配制的供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成代謝產(chǎn)物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的原材料可分為碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因素和水。根據(jù)微生物的種類(lèi)和實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?，培養(yǎng)基也有不同的種類(lèi)和配制方法。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用較普遍和較普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱(chēng)為普通培養(yǎng)基。由于這種培養(yǎng)基中含有一般細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需要的較基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，所以可供微生物生長(zhǎng)繁殖之用。干熱天菌、高壓蒸汽滅菌方法主要是通過(guò)升溫使蛋白質(zhì)變性從而達(dá)到殺死微生物的效果。培養(yǎng)基制備器每稱(chēng)完一種成分即在配方面軍做出記號(hào)，并將所需稱(chēng)取的藥品一次取齊，置于左側(cè)。海南培養(yǎng)基制備器價(jià)格

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：用過(guò)的玻璃器皿：凡確無(wú)病原菌或未被帶菌物污染的器皿，使用后可隨時(shí)沖洗，吸取過(guò)化學(xué)試劑的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必須經(jīng)過(guò)適當(dāng)消毒后，將污垢除去，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈。若用皂液未能洗凈的器皿，可用洗液浸泡適當(dāng)時(shí)間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸，其作用是將有機(jī)物氧化成可溶性物質(zhì)，以便沖洗。洗液有很強(qiáng)的腐蝕作用，使用時(shí)應(yīng)特別小心，避免濺到衣服、身體和其他物品上。吉林自動(dòng)攪拌培養(yǎng)基制備器制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基的購(gòu)置：從培養(yǎng)基自身的質(zhì)量來(lái)看，不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品，甚至同一廠家不同批號(hào)的產(chǎn)品都會(huì)存在差異。依據(jù)ISO/IEC17025《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》，對(duì)培養(yǎng)基的供應(yīng)企業(yè)進(jìn)行評(píng)價(jià)后選擇合格的供應(yīng)商，這是培養(yǎng)基購(gòu)買(mǎi)過(guò)程中重要的步驟。應(yīng)選擇產(chǎn)品市場(chǎng)信譽(yù)度高、有質(zhì)量保證能力和服務(wù)保證能力的企業(yè)；企業(yè)是否通過(guò)了質(zhì)量管理體系的認(rèn)證是較為客觀的評(píng)價(jià)指標(biāo)。要求生產(chǎn)企業(yè)提供：培養(yǎng)基成分名稱(chēng)及產(chǎn)品編號(hào)、批號(hào)、使用前的pH、儲(chǔ)藏信息和有效期、性能評(píng)價(jià)和所用測(cè)試菌株、技術(shù)數(shù)據(jù)清單、質(zhì)控證書(shū)以及必要的安全/危害數(shù)據(jù)等材料。

制備培養(yǎng)基的操作要點(diǎn)：a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的，其中的成分基本上溶于水，沒(méi)有明顯的固形物，液體培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分分布均勻，易于控制微生物的生長(zhǎng)代謝狀態(tài)。b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂、明膠、硅膠等，以瓊脂為常用。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分普遍。在實(shí)驗(yàn)室中，它被用作微生物的分離、鑒定、檢驗(yàn)雜菌、計(jì)數(shù)、保藏、生物測(cè)定等。c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中，就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例，它的用量在0.2~1%之間。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來(lái)觀察微生物的動(dòng)力，有時(shí)用來(lái)保藏菌種。培養(yǎng)基制備器一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法，濾紙應(yīng)拆疊成折扇成漏斗形。

培養(yǎng)平板培養(yǎng)基是被用于獲得微生物純培養(yǎng)的很常用的固體培養(yǎng)基形式，它是冷卻凝固后的固體培養(yǎng)基在無(wú)菌培養(yǎng)皿中形成的培養(yǎng)基固體平面，常被簡(jiǎn)稱(chēng)為培養(yǎng)平板。也叫平面培養(yǎng)基、平皿培養(yǎng)基。平板培養(yǎng)基常用于單孢分離，測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度，觀察菌落的形態(tài)，拮抗實(shí)驗(yàn)，測(cè)定接種空間雜菌數(shù)。平板培養(yǎng)基制作方法如下：將培養(yǎng)皿洗凈、干燥，使各培養(yǎng)皿蓋方向一致，用牛皮紙包好，或放入特制鐵罐內(nèi)，注明皿蓋的方向。高壓滅菌或干燥滅菌后備用。取剛滅菌后尚未凝固的培養(yǎng)基置于無(wú)菌箱或超凈工作臺(tái)內(nèi)，先左手持三角瓶,右手反轉(zhuǎn)手掌用中指和無(wú)名指撥出棉塞或硅膠賽(或不翻轉(zhuǎn)手掌用小指和手掌撥出棉塞),同時(shí)將三角瓶轉(zhuǎn)換至右手，而后左手拿平皿,以大拇指和中指將皿蓋打開(kāi)一縫，至瓶口剛好伸人。三角瓶口經(jīng)火焰燒灼后，傾入滅菌或溶化、冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基約15mL(勿使瓶口靠在平皿壁上，以免沾染皿壁)，迅速蓋好皿蓋，置于桌上輕輕旋轉(zhuǎn)平皿,使培養(yǎng)基均勻分布于整個(gè)平皿底部,冷凝后即為平板培養(yǎng)基。有時(shí)凝固后的培養(yǎng)基表面有冷凝水，可將平皿蓋打開(kāi)倒置于37℃溫箱，除去冷凝水，否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。為防止冷凝水過(guò)多，也可將培養(yǎng)基冷卻至45~50°C再倒平板。全自動(dòng)培養(yǎng)基制備分裝系統(tǒng)：一體化控制;主機(jī)和選配件（附加劑泵）可通過(guò)Mediafill觸摸屏一起控制。湖南瓊脂培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備器殺菌劑可從此口加入，也可用注射器從硅酮膜注入。海南培養(yǎng)基制備器價(jià)格

對(duì)LST（月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯）培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，有時(shí)發(fā)酵管內(nèi)會(huì)有氣泡。為防止發(fā)酵管內(nèi)產(chǎn)生氣泡，可以采取以下幾項(xiàng)措施：（1）小倒管浸滿培養(yǎng)基（不留氣泡）后再加入到盛LST的試管中。（2）滅菌鍋關(guān)閉放氣閥前，將鍋內(nèi)氣體排干凈。（3）試管塞不要塞得太緊（使用硅膠塞的時(shí)候），勿使用橡皮塞。（4）不要過(guò)早打開(kāi)滅菌鍋，要等滅菌鍋內(nèi)氣體和溫度都降到與室溫一致或相差不大時(shí)再打開(kāi)滅菌鍋。如果以上情況都做到還有氣泡，可用水做培養(yǎng)基組的對(duì)照試驗(yàn)，若培養(yǎng)基組有氣泡，而對(duì)照組沒(méi)有氣泡，可確定是培養(yǎng)基自身的原因。海南培養(yǎng)基制備器價(jià)格

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